抗原抗体的比例是浊度形成的关键因素。
当抗原过量时，形成的IC分子小，会发生再解离，使浊度降低，光散射也降低。这就是大剂量的钩子效应。当抗体过量时，IC的形成随着抗原的增加而增加，并在抗原和抗体的较合适比例处达到峰值，这就是经典的海德堡曲线理论。
有必要在反应系统中保持适当过量的抗体。如果形成过量抗原，则测定的准确性将降低。
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